生物技术

实验编号：U22S02600

关键词：毛酸浆，总RNA，PDS基因，PCR扩增，电泳，侵染母液，侵染转化

（一）内容介绍

在大多数已成功的体系中，通常选择一个与光合作用有关的酶——八氢番茄红素去饱和酶（phytoene desaturase，PDS）作为报告基因。PDS基因在多数物种中仅有一个拷贝，并且具有较广的表达域；其所编码的蛋白质是类胡萝卜素合成途径中的一个关键性酶，它的沉默直接导致类胡萝卜素合成途径的阻断，使植物丧失光保护的作用，从而导致白化效应，表型变化较为直观。同时，PDS基因在植株叶片中表达，当植株被病毒载体成功侵染后，植株叶片会很快呈现出白化趋势，因此可以快速地确定病毒诱导体系是否适用于该物种的研究。

本项目共分为6个模块。模块1，前期准备；模块2，毛酸浆总RNA提取及电泳分析；模块3，毛酸浆PDS基因3’端序列的分离；模块4，毛酸浆PDS基因5’端序列的分离；模块5，毛酸浆PDS-TRV2侵染母液的制备；模块6，毛酸浆PDS-TRV2侵染转化。

模块1，前期准备

模块2，毛酸浆总RNA提取及电泳分析

模块3，毛酸浆PDS基因3’端序列的分离

模块4，毛酸浆PDS基因5’端序列的分离

模块5，毛酸浆PDS-TRV2侵染母液的制备

模块6，毛酸浆PDS-TRV2侵染转化

（二）实验的特色和亮点

虚拟仿真实验软件综合运用分子生物学的知识与研究方法，详细介绍了VIGS技术的工作原理、基本操作、仪器参数的设置、以及在基因功能研究方面的应用。通过模拟具体操作步骤，使实验过程更加直观，通过改变仪器参数，可观察不同的实验现象和结果。